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渦旋混合器在去氫駱駝蓬堿聚乳酸納米粒的制備

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-08-26 09:51【

駱駝蓬 Peganum harmala L. 為蒺藜科駱駝蓬 屬多年生草本植物,去氫駱駝蓬堿是其主要活性成 分之一,具有提高免疫、輻射防護(hù)、抗菌、抗腫 瘤、中樞興奮等藥理作用,但該成分水溶性很 差,生物利用度低下。因此,有必要采用制劑新技術(shù)來解決這一問題,推進(jìn)它在臨床上的應(yīng)用。



1 材料

Agilent 1260 型高效液相色譜儀 ( 美國 Agilent 公司) ; AR2140 型電子天平 [梅特勒-托利多儀器 ( 上海) 有 限 公 司]; VORTEX-5 型 渦 旋 混 合 器 ( 海門市其林貝爾儀器制造有限公司) ; JY92-II 型 超聲儀 ( 寧波新知科儀器研究所) ; YC-1200 型臺 式冷凍干 燥 機(jī) ( 北京亞星儀科科技發(fā)展有限公 司) ; Master-sizer 型粒度分析儀 ( 英國馬爾文儀器 有限公司) ; MD200-2 型氮?dú)獯祾邇x ( 杭州奧威儀器有限公司) ; 。 去氫駱駝蓬堿對照品 ( 批號 20170115,南京 澤朗醫(yī)藥科技有限公司,含有量> 98%) 。聚乳酸 ( 分子量 15 000,批號 2016081715,山東岱罡科技 有限公司) ; Poloxamer 188 ( 德國巴斯夫公司,含 有量 > 98%) 。甲 醇 為 色 譜 純; 其他試劑均為分 析純。 SD 大鼠,雌雄兼具,體 質(zhì) 量 ( 300 ± 20) g, 購自上海斯萊克實驗動物有限公司,許 可 證 號 SCXK ( 滬) 2012-0002。



2 方法與結(jié)果

2. 1 去氫駱駝蓬堿含有量測定

2. 1. 1 色譜條件


Waters C18 色譜柱 ( 250 mm × 4. 6 mm,5 μm) ; 流動相甲醇-0. 2% 甲酸 ( 55 ∶ 45) ; 檢測波長 248 nm; 體積流量 1. 0 mL /min; 柱 溫 35 ℃ ; 進(jìn)樣量 20 μL。



2. 1. 2 線性關(guān)系考察

精密稱取去氫駱駝蓬堿對 照品 10. 0 mg,置于 10 mL 量瓶中,加入適量甲醇 超聲溶解,室溫下放置 40 min 后甲醇定容,精密 量取 適 量,甲 醇 稀 釋 成 20. 0、10. 0、5. 0、0. 5、 0. 05 μg /mL,在 “2. 1. 1” 項色譜條件下進(jìn)樣測 定。以峰面積 ( Y) 對溶液質(zhì)量濃度 ( X) 進(jìn)行回 歸,得方程為 Y = 1. 212 4X+0. 009 3 ( r = 0. 999 9) , 在 0. 05~20. 0 μg /mL 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。



2. 1. 3 方法學(xué)考察

取 0. 05、5. 0、20. 0 μg /mL 對照品溶液,在 “2. 1. 1”項色譜條件下進(jìn)樣測定 5 次,測得 3 種質(zhì)量濃度下日內(nèi)精密度 RSD 分別為 0. 43%、0. 19%、0. 17%,日間精密度 ( 連續(xù)測定 5 d,每 天 1 次) RSD 分 別 為 0. 82%、0. 37%、 0. 15%。取空白納米粒混懸液或 1. 0%十二烷基硫酸鈉水溶液 1 mL,加入 0. 5、5. 0、20. 0 μg /mL 對 照品溶液各 1 mL,測得去氫駱駝蓬堿平均加樣回 收率為 99. 71%,RSD 小于 1. 76%。



2. 2 聚乳酸納米粒制備

精密稱取去氫駱駝蓬堿 20 mg、聚乳酸 160 mg,溶于 25 mL 丙酮-乙醇等比 例混合溶液中,注射器緩慢加到 50 mL 含 0. 25% Poloxamer 188 的水相中,超聲 10 min,減壓旋蒸除 去有機(jī)溶劑,濃縮,離心 60 min ( 25 000 r/min) , 沉淀物用蒸餾水洗滌后定容至 10 mL,以 5%甘露 醇為凍干保護(hù)劑,-70 ℃下預(yù)凍 48 h,掛入冷凍干 燥機(jī)中制備,即得,以去氫駱駝蓬堿計,含有量為 2. 88%。同法制備空白聚乳酸納米粒。



2. 3 粒徑、PDI、Zeta 電位測定

取聚乳酸納米 粒凍干前混懸液,蒸餾水適當(dāng)稀釋后放入比色池 中,測定粒徑、PDI、Zeta 電位。 聚乳酸納米粒粒徑分布在 100 ~ 450 nm 之間,平均 粒 徑 為 ( 195. 38 ± 2. 02 ) nm,PDI 為 ( 0. 131 ± 0. 034) ,Zeta 電位為 ( -19. 48±0. 36) mV。



3 討論

本實驗制備的去氫駱駝蓬堿聚乳酸納米粒粒徑 較小,分布均勻,可能是由于溶解藥物、載體的丙酮和乙醇可在水相中迅速擴(kuò)散,易得到較小的粒徑; 水相中表面活性劑對納米粒具有穩(wěn)定作 用,不易發(fā)生粘連,平均粒徑為 ( 195. 38± 2. 02) nm,而凍干后雖增加至 ( 203. 28 ± 3. 94) nm,但 粒徑變化無顯著差異 ( P>0. 05) 。另外,混合溶劑 乙醇與丙酮的比例不可過高,以防聚乳酸析出; 水 相中表面活性劑濃度也不宜太高,防止增溶作用使 去氫駱駝蓬堿溶于水相,從而降低包封率、載藥 量,經(jīng)前期預(yù)實驗考察,最終選擇 0. 25%。



 


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